Question

15．如表是某同學(xué)列出的分離并計(jì)數(shù)土壤中微生物培養(yǎng)基的配方，據(jù)此回答下列問題：

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4•7H2O	0.2g
葡萄糖	10.0g
尿素	1.0g
瓊脂	15.0g

（1）制備培養(yǎng)基時(shí)，將上述物質(zhì)溶解并用蒸餾水定容至1000mL后，還要進(jìn)行滅菌和倒平板．
（2）從功能上看，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，細(xì)菌能利用培養(yǎng)基中的氮源是由于能合成脲酶（催化尿素分解的酶）．
（3）用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)，（需要/不需要）需要設(shè)置對(duì)照組（即不接種進(jìn)行培養(yǎng)），原因是判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染
（4）某同學(xué)在3個(gè)培養(yǎng)基上分別涂布稀釋倍數(shù)為10⁶的土壤樣液0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，其菌落數(shù)分別為180、220、320個(gè)，則每毫升原土壤樣液中上述微生物的數(shù)量為2.4×10⁹，此方法測(cè)定的活菌數(shù)比實(shí)際活菌數(shù)少的原因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上只能觀察到一個(gè)菌落．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)微生物時(shí)，培養(yǎng)基中需要加入碳源、氮源、無機(jī)鹽、水，還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)PH，特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．如培養(yǎng)乳酸菌需要加入維生素，培養(yǎng)霉菌需要把PH值調(diào)到酸性等．
2、能夠分解利用尿素的細(xì)菌，其細(xì)胞內(nèi)含有脲酶，可以把尿素分解成氨，提供N源，進(jìn)一步利用，只含有尿素作為N源的培養(yǎng)基對(duì)微生物具有選擇作用．

解答 解：（1）制備培養(yǎng)基時(shí)，將上述物質(zhì)溶解并用蒸餾水定容至1000mL后，還要進(jìn)行滅菌和倒平板．
（2）分析表格可知，培養(yǎng)基中以尿素作為唯一氮源，能生長(zhǎng)的菌落說明能利用尿素中的氮源，所以該培養(yǎng)基從用途上屬于選擇培養(yǎng)基．細(xì)菌能利用培養(yǎng)基中的氮源是由于能合成脲酶（催化尿素分解的酶）．
（3）用稀釋涂布平板法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)，為了判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染，因此實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置對(duì)照組（即不接種進(jìn)行培養(yǎng)）．
（4）某同學(xué)在3個(gè)培養(yǎng)基上分別涂布稀釋倍數(shù)為10⁶的土壤樣液0.1mL，培養(yǎng)一段時(shí)間后，其菌落數(shù)分別為180、220、320個(gè)，則每毫升原土壤樣液中上述微生物的數(shù)量=（180+220+320）÷3×10⁶÷0.1=2.4×10⁹，此方法測(cè)定的活菌數(shù)比實(shí)際活菌數(shù)少的原因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上只能觀察到一個(gè)菌落．
故答案為：
（1）滅菌倒平板
（2）選擇脲酶（催化尿素分解的酶）
（3）需要判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染
（4）2.4×10⁹當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上只能觀察到一個(gè)菌落

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的培養(yǎng)、分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)等相關(guān)知識(shí)，意在考查考生識(shí)記所列知識(shí)點(diǎn)，并能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論的能力．