Question

13．如圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線．請(qǐng)回答：

（1）天然質(zhì)粒需經(jīng)改造才能作為基因工程的運(yùn)載體，改造過(guò)程需要限制酶和DNA連接酶酶，經(jīng)改造后的質(zhì)粒同時(shí)具備的條件有①②③④（填序號(hào)）．
①標(biāo)記基因�、谝粋�(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)�、蹖�(duì)受體細(xì)胞無(wú)害�、軉�動(dòng)子　⑤起始密碼子
（2）用圖2中的人乳鐵蛋白目的基因和圖1所示的質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，選用的限制酶是BamHⅠ/HindⅢ（從“EcoRⅠ”、“BamHⅠ/HindⅢ”、“SmaⅠ/HindⅢ”中選擇）．
（3）圖3中，①常用的導(dǎo)入方法是顯微注射法．在利用大腸桿菌做受體細(xì)胞時(shí)，需要先用Ca²⁺處理，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，有利于其吸收重組DNA分子．

Answer 1

分析 分析題圖：圖1是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的過(guò)程，該過(guò)程采用了基因工程技術(shù)（①目的基因的獲取、②基因表達(dá)載體的構(gòu)建、③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、④目的基因的檢測(cè)與表達(dá)）、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)．

解答 解：（1）天然質(zhì)粒往往需經(jīng)過(guò)改造才能作為基因工程中的運(yùn)載體，改造過(guò)程需要限制酶和DNA連接酶；經(jīng)改造后的質(zhì)粒同時(shí)具備的條件有①標(biāo)記基因、②多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)、③對(duì)受體細(xì)胞無(wú)害和④啟動(dòng)子，而⑤起始密碼子位于mRNA上．
（2）若選EcoRⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的復(fù)制原點(diǎn)；若選SmaⅠ/HindⅢ，則構(gòu)建的重組質(zhì)粒沒(méi)有標(biāo)記基因或復(fù)制原點(diǎn)，所以用圖2中的人乳鐵蛋白目的基因和圖1所示的質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，選用的限制酶是BamHⅠ/HindⅢ．
（4）過(guò)程①是將目的基因?qū)�入�?dòng)物受精卵，所用方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞常用感受態(tài)細(xì)胞法，即先用Ca²⁺處理，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，有利于其吸收重組DNA分子．
故答案為：
（1）限制酶和DNA連接酶   ①②③④
（2）BamHⅠ/HindⅢ
（3）顯微注射法　感受態(tài)

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖表，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作工具及其特點(diǎn)；識(shí)記基因工程的操作步驟，掌握其應(yīng)用，能根據(jù)圖中和表中信息選擇合適的限制酶，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．