Question

10．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用．請(qǐng)分析回答有關(guān)問(wèn)題從土壤中分離分解尿素的細(xì)菌的有關(guān)問(wèn)題．
（1）如果要對(duì)培養(yǎng)的菌落進(jìn)行純化，在培養(yǎng)基上劃線操作中，操作的第一步及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，目的依次是滅菌、為了讓每一次劃線的菌種來(lái)自上一次劃線的末端．
（2）劃線操作必須在酒精燈火焰附近進(jìn)行，畫線完成后將平板倒置，目的是：防止培養(yǎng)皿內(nèi)壁上出現(xiàn)的冷凝水污染培養(yǎng)基．
（3）表是一種培養(yǎng)基配方（加蒸餾水定容到1000mL）

成分	KH2PO4	Na2HPO4	MgSO47H2O	葡萄糖	尿素	瓊脂
含量	1.4g	2.1g	0.2g	10.0g	1.0g	15.0g

①（多選題）該培養(yǎng)基屬于BD培養(yǎng)基．
A．液體       B．固體        C．鑒定       D．選擇
②該培養(yǎng)基中，葡萄糖為微生物提供的營(yíng)養(yǎng)要素是碳源．
③使用該培養(yǎng)基的目的是篩選出能夠分解尿素的細(xì)菌．
④在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，可初步鑒定出該種細(xì)菌能分解尿素．
（4）（多選）在進(jìn)行分離分解尿素細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中，A同學(xué)從培養(yǎng)基篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落．A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有AB．
A．土樣不同      B．培養(yǎng)基污染         C．沒(méi)有設(shè)置對(duì)照．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基的類型
（1）按物理性質(zhì)分：

名稱	特征	功能
固體培養(yǎng)基	外觀顯固體狀態(tài)的培養(yǎng)基	主要用于微生物的分離、鑒定
液體培養(yǎng)基	呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基	主要用于工業(yè)生產(chǎn)

（2）按功能分：

種類	制備方法	特征	用途
選擇培養(yǎng)基	培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)成分	根據(jù)某種微生物的特殊營(yíng)養(yǎng)要求或其對(duì)某化學(xué)、物理因素的抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基使混合菌樣中的劣勢(shì)菌變成優(yōu)勢(shì)菌，從而提高該菌的篩選率	加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌
鑒別培養(yǎng)基	加入某種試劑或化學(xué)藥品	依據(jù)微生物產(chǎn)生的某種代謝產(chǎn)物與培養(yǎng)基中特定試劑或化學(xué)藥品反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化而設(shè)計(jì)	鑒別和區(qū)分菌落相似的微生物伊紅和美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌

2、微生物常見(jiàn)的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落．

解答 解：（1）如果要對(duì)培養(yǎng)的菌落進(jìn)行純化，在培養(yǎng)基上劃線操作中，操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止雜菌污染，在每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)，目的時(shí)為了讓每一次劃線的菌種來(lái)自上一次劃線的末端．
（2）劃線操作必須在酒精燈火焰附近進(jìn)行，為了防止培養(yǎng)皿內(nèi)壁上出現(xiàn)的冷凝水污染培養(yǎng)基，畫線完成后將平板倒置．
（3）①分析培養(yǎng)基的成分可知，瓊脂作為凝固劑，因此該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基；該培養(yǎng)基配方中只有尿素作為唯一氮源，因此從功能上來(lái)說(shuō)，該培養(yǎng)基又是選擇培養(yǎng)基．
②該培養(yǎng)基中，葡萄糖為微生物提供碳源．
③培養(yǎng)基中以尿素作為唯一氮源，因此使用該培養(yǎng)基的目的是篩選出能夠分解尿素的細(xì)菌．
④在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，可初步鑒定出該種細(xì)菌能分解尿素．
（4）由題意知，該同學(xué)與其他同學(xué)獲得的菌落數(shù)差異很大，可能的原因是采用的土樣不同，培養(yǎng)基滅菌不徹底，培養(yǎng)基被污染，或者是實(shí)驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)有進(jìn)行無(wú)菌操作等，該實(shí)驗(yàn)無(wú)需設(shè)置空白對(duì)照．
故答案為：
（1）滅菌    為了讓每一次劃線的菌種來(lái)自上一次劃線的末端
（2）倒置     防止培養(yǎng)皿內(nèi)壁上出現(xiàn)的冷凝水污染培養(yǎng)基
（3）①BD
②碳源
③篩選出能夠分解尿素的細(xì)菌
④酚紅
（4）AB

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查微生物的實(shí)驗(yàn)室分離和培養(yǎng)，要求考生能夠掌握微生物分離與純化的方法，能夠根據(jù)培養(yǎng)基的配方確定培養(yǎng)的類型，掌握尿素分解菌分離和鑒定的方法，再結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題．