Question

4．科學(xué)家從病死的家禽和候鳥體內(nèi)分離到了H5N1禽流感病毒，用以生產(chǎn)可以預(yù)防和治療禽流感的抗體，圖為單克隆抗體制備過程示意圖，圖中A～G分別表示生物技術(shù)或細(xì)胞名稱，請回答有關(guān)問題：

（1）若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則B細(xì)胞是取自感染H5N1病毒的動物或人的細(xì)胞，C過程化學(xué)誘導(dǎo)試劑常用PEG（聚乙二醇）．
（2）僅考慮某細(xì)胞兩兩融合，可能形成3種類型D細(xì)胞，需經(jīng)兩次篩選出既能迅速大量繁殖又能產(chǎn)生特異性抗體（填特點(diǎn)）的E細(xì)胞用于培養(yǎng)．
（3）在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中培養(yǎng)液中必須通入O₂和CO₂，通入CO₂的目的是維持培養(yǎng)液的pH．隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增多，就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制．
（4）如果將單克隆抗體基因?qū)�入奶牛受精卵，再通過胚胎體外培養(yǎng)和胚胎分割和胚胎移植，可獲得多頭遺傳物質(zhì)相同奶牛，從而從乳汁中提取更多的抗體．

Answer 1

分析 1、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．
2、兩次篩選：①篩選得到雜交瘤細(xì)胞（去掉未雜交的細(xì)胞以及自身融合的細(xì)胞）；②篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群．

解答 解：（1）單克隆抗體制備時將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，若A細(xì)胞是小鼠骨髓瘤細(xì)胞，則B細(xì)胞是取自感染H₅N₁禽流感病毒的動物或人的細(xì)胞．C過程為動物細(xì)胞融合，利用的誘導(dǎo)方法有物理法（電激、離心、振動等）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）．
（2）假設(shè)僅考慮某兩個細(xì)胞的融合，則可能形成雜交瘤細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、效應(yīng)B細(xì)胞自身融合細(xì)胞3種類型的D細(xì)胞，因此需用選擇性培養(yǎng)基篩選出既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞用于培養(yǎng)．
（3）在動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中培養(yǎng)液中必須通入O₂和CO₂，通入CO₂的目的是維持培養(yǎng)液的pH．隨著細(xì)胞分裂次數(shù)的增多，就會停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制，需要用胰蛋白酶等處理使細(xì)胞從瓶壁上分離下來．
（4）培育轉(zhuǎn)基因動物，應(yīng)該選用受精卵作為受體細(xì)胞；來自同一個胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)．如果將單克隆抗體基因?qū)�入奶牛受精卵，再通過胚胎體外培養(yǎng)和胚胎分割移植，可獲得多頭遺傳物質(zhì)相同奶牛，從而從乳汁中提取更多的抗體．
故答案為：
（1）感染H5N1病毒的動物或人　   PEG（聚乙二醇）
（2）既能迅速大量繁殖又能產(chǎn)生特異性抗體
（3）維持培養(yǎng)液的pH　接觸抑制
（4）受精卵    胚胎分割和胚胎移植

點(diǎn)評 本題以單克隆抗體的制備圖解為載體，考查了多項(xiàng)生物工程技術(shù)，具有一定的綜合性．考生要識記動物細(xì)胞融合的方法；識記單克隆抗體制備的步驟；識記動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件和特點(diǎn)．