Question

科學(xué)家嘗試使用Cre/loxP位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng)，在檢測目的基因?qū)�入成功后，刪除轉(zhuǎn)基因煙草細(xì)胞內(nèi)的抗除草劑基因。其技術(shù)過程如下(圖中的■代表基因前的啟動子)，據(jù)圖回答：

(1) loxP是一種只有34個(gè)堿基對構(gòu)成的小型DNA片段，是有兩個(gè)13個(gè)堿基對反向重復(fù)序列和中間間隔的8個(gè)堿基對序列共同組成，自身不會表達(dá)，插入質(zhì)粒后也不影響原有基因的表達(dá)，其堿基序列如下：

Cre酶能特異性地識別此序列并在箭頭處切開loxP，其功能類似于基因工程中的________酶。從遺傳學(xué)角度分析，Cre酶改變質(zhì)粒產(chǎn)生的結(jié)果相當(dāng)于可遺傳變異中的________。

(2) 將重組質(zhì)粒導(dǎo)入到植物細(xì)胞中最常用的方法是________________。作為標(biāo)記基因，抗除草劑基因用于檢測目的基因是否導(dǎo)入成功的原理是________。

(3) 經(jīng)檢測成功后，抗除草劑基因已沒有用途，繼續(xù)留在植物體內(nèi)可能會造成的安全問題是________。經(jīng)Cre酶處理后，質(zhì)粒中的兩個(gè)loxP序列分別被切開后，可得到如上圖右側(cè)的這兩個(gè)DNA分子。由于________________的原因，抗除草劑基因不再表達(dá)，之后會在培養(yǎng)過程中消失。

(4) loxP序列是有方向性的。如果經(jīng)Cre酶處理后，發(fā)現(xiàn)抗除草劑基因反向連接在質(zhì)粒一上，則原來質(zhì)粒一中這兩個(gè)loxP序列的方向是________。

A. 兩個(gè)都是正向 B. 兩個(gè)都是反向 C. 一個(gè)正向一個(gè)反向 D. 與方向無關(guān)

Answer 1