Question

18．人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動物的胃，可用來發(fā)酵處理秸稈，提高秸稈的營養(yǎng)價值．為了增強發(fā)酵效果，研究人員從牛胃中篩選纖維素酶高產(chǎn)菌株，并對其降解纖維素能力進行了研究．請回答下列問題：
（1）在樣品稀釋和涂布平板步驟中，下列選項不需要的是③ （填序號）．
①酒精燈  ②培養(yǎng)皿  ③顯微鏡  ④無菌水
（2）在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導致菌體堆積，影響分離效果．
（3）向試管內(nèi)分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時，若試管口粘附有培養(yǎng)基，需要用酒精棉球擦凈的原因是防止雜菌污染．
（4）剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物，但并不與纖維素降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應．研究人員在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩到了幾株有透明降解圈的菌落（見圖1）． 圖中降解圈大小與纖維素酶的量與活性 有關．圖中降解纖維素能力最強的菌株是① （填圖中序號）．
（5）研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4，在不同溫度和pH條件下進行發(fā)酵，測得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見圖2推測菌株J₄ 更適合用于人工瘤胃發(fā)酵，理由是發(fā)酵過程會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，J₄菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高．

Answer 1

分析 1、微生物培養(yǎng)的關鍵是無菌操作，無菌技術包括消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

2、微生物培養(yǎng)過程中除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮pH、溫度和滲透壓等條件，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進行消毒．
3、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落．
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落．
4、可以通過稀釋涂布平板法或顯微鏡計數(shù)法進行統(tǒng)計計數(shù)．
5、剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，紅色復合物無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，我們可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌．

解答 解：（1）在樣品稀釋和涂布平板步驟中，需要使用酒精燈對接種環(huán)進行滅菌，對培養(yǎng)皿進行滅菌，用無菌水稀釋菌液，故選③．
（2）在涂布平板時，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量過多會在培養(yǎng)基表面出現(xiàn)積液，導致菌體堆積，影響分離效果，所以不能過多．
（3）分裝含瓊脂的培養(yǎng)基時，若試管口粘附有培養(yǎng)基，需要用酒精棉球擦凈以防雜菌污染．
（4）在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩到了幾株有透明降解圈的菌落，降解圈大小與纖維素酶的多少和活性有關．纖維素酶的量越多，活性越強，分解的纖維素越多，透明降解圈越大，所以圖中降解纖維素能力最強的菌株是①．
（5）由于胃部PH值較低，根據(jù)題意和圖示分析可知，發(fā)酵過程會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，J₄菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高，所以推測菌株J4更適合用于人工瘤胃發(fā)酵．
故答案為：
（1）③
（2）培養(yǎng)基表面的菌懸液會出現(xiàn)積液，導致菌體堆積，影響分離效果
（3）防止雜菌污染  
（4）量與活性   ①
（5）J₄    發(fā)酵過程會產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，J₄菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高

點評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記無菌技術，掌握接種微生物常用的兩種方法，能結(jié)合題中和圖中信息準確答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．