Question

（11分）下圖是利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人胰島素的操作過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖作答。

（1）構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時(shí)，用不同類(lèi)型的限制酶切割DNA后，可能產(chǎn)生粘性末端，也可能產(chǎn)生_____末端。過(guò)程②必需的酶是        酶，過(guò)程③必需的酶是       酶。

（2）在利用AB獲得C的過(guò)程中，必須用              切割A(yù)和B，使它們產(chǎn)生相同的粘性末端，再加入         ，才可形成C。利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時(shí)，構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動(dòng)子等，其中啟動(dòng)子的作用是__              ___。

（3）為使過(guò)程⑧更易進(jìn)行，可用       （藥劑）處理D。

（4）為了檢測(cè)胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，可用標(biāo)記的胰島素基因片段作探針與mRNA雜交，該雜交技術(shù)稱(chēng)為_(kāi)__       ___。為了檢測(cè)胰島素基因請(qǐng)轉(zhuǎn)錄的mRNA是否翻譯成_____，常用抗原-抗體雜交技術(shù)。

（5）如果要將某目的基因通過(guò)農(nóng)桿菌傳話法導(dǎo)入植物細(xì)胞，先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的_____中，然后通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化作用將目的基因插入植物細(xì)胞的______上。

 

Answer 1

【答案】

（11分）（1）平末端  逆轉(zhuǎn)錄    解旋

（2）同一種限制性內(nèi)切酶     DNA連接酶

RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合部位，驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄

（3）CaCl₂      （4）DNA分子雜交技術(shù)　　蛋白質(zhì)

（5）T－DNA　染色體DNA

【解析】基因工限制酶切末端有粘性末端和平末端，由mRNA獲得DNA的途徑是逆轉(zhuǎn)錄法，在此過(guò)程中需乃至 逆轉(zhuǎn)錄酶、、真核生物的的基因由編碼區(qū)和非編碼區(qū)組成編碼區(qū)含有內(nèi)含子(不編碼蛋白質(zhì))，成熟的信使RNA不含內(nèi)含子和非編碼區(qū)所轉(zhuǎn)錄的對(duì)應(yīng)的序列。故逆囩成的DNA中無(wú)內(nèi)含子與非編碼區(qū)；B能與目的基因結(jié)合并將目的基因?qū)�入大腸桿菌，所以B為運(yùn)載體，大腸桿菌中的質(zhì)粒常為運(yùn)載體，運(yùn)載體上面的標(biāo)記基因是為了篩選了導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞，能將運(yùn)載體切割的酶是限制性核酸內(nèi)切酶，將目的基因與運(yùn)載體相連的是DNA連接酶，將目的基因?qū)�入大腸桿菌進(jìn)，常用 CaCl2 溶液處理大腸桿菌，增加細(xì)胞壁的通透性由于基因的選擇性表達(dá)，胰島素基因只在胰島B細(xì)胞內(nèi)表達(dá)而不在肝臟內(nèi)表達(dá)，所以在肝臟細(xì)胞中不能轉(zhuǎn)錄出翻譯胰島素的模板信使RNA。利用DNA雜交技術(shù)檢測(cè)是否導(dǎo)入成功，利用抗原抗體反應(yīng)檢測(cè)是否表達(dá)，將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞通常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將目的基因與T—DNA結(jié)合將目的基因?qū)�入到植物�?xì)胞核中的染色體上。