Question

5．尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細菌的分解，就不能很好地被植物利用．生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，同學(xué)們設(shè)計了以下實驗來探究土壤中微生物對尿素的分解作用，并成功篩選到能高效降解尿素的細菌（目的菌）．培養(yǎng)基成分如下表所示．

KH2PO4	1.4g
Na2HPO4	2.1g
MgSO4•7H2O	0.2g
葡萄糖	10g
尿素	1g
瓊脂	15g
將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL

回答問題
（1）“目的菌”生長所需的碳源和氮源分別來自培養(yǎng)基中的葡萄糖和尿素．
（2）為說明上表所示培養(yǎng)基具有選擇作用，應(yīng)配置含有牛肉膏蛋白胨（填物質(zhì)名稱）的培養(yǎng)基作為實驗對照，如果對照培養(yǎng)基上的菌落數(shù)明顯多于（選填“多于”或“少于”）表中培養(yǎng)基中的菌落數(shù)目，說明表中培養(yǎng)基已篩選出一些目的菌．
（3）此培養(yǎng)基不能（選填“能”或者“不能”）用于植物組織培養(yǎng)，理由是該培養(yǎng)基中缺少植物激素（或缺少植物需要的各種營養(yǎng)）．
（4）一般通過稀釋涂布平板法統(tǒng)計菌落數(shù)來推算細菌數(shù)量，但統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少（選填“少”或“多”），原因是當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落．
（5）與分解尿素的細菌相比，纖維素分解菌的篩選過程中用到剛果紅染色法法，這種方法只是分離純化的第一步，為了確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵生產(chǎn)纖維素酶的實驗．

Answer 1

分析 微生物的培養(yǎng)基含有較多的有機物，培養(yǎng)基的主要營養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源水和無機鹽等．用于植物組織培養(yǎng)的MS培養(yǎng)基含有較多的大量元素和微量元素及植物激素．選擇培養(yǎng)基的目的是篩選目的菌，在固體培養(yǎng)基上接種的方法通常是稀釋涂布平板法和平板劃線法．接種過程中培養(yǎng)基、接種器具要滅菌，操作者的雙手和環(huán)境要消毒．

解答 解：（1）據(jù)表分析，“目的菌”生長所需的碳源和氮源分別來自培養(yǎng)基中的葡萄糖和尿素．
（2）題表中的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基，為說明上表所示培養(yǎng)基具有選擇作用，應(yīng)配置含有牛肉膏蛋白胨的培養(yǎng)基作為對照試驗，對照組的培養(yǎng)基沒有選擇作用，幾乎大多數(shù)的微生物當(dāng)生長，故如果對照培養(yǎng)基上的菌落數(shù)明顯多于表中培養(yǎng)基中的菌落數(shù)目，說明表中培養(yǎng)基已篩選出一些目的菌．
（3）此培養(yǎng)基不能用于植物組織培養(yǎng)，因為缺少植物激素，植物激素的用量及使用順序影響植物組織培養(yǎng)．
（4）用稀釋涂布平板法進行微生物計數(shù)時，由于所產(chǎn)生的菌落可能是由兩個或多個細胞形成的，所以統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目偏少．
（5）與分解尿素的細菌相比，纖維素分解菌的篩選過程中用到剛果紅染色法，這種方法只是分離純化的第一步，為了確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行發(fā)酵生產(chǎn)纖維素酶的實驗．
故答案為：
（1）葡萄糖    尿素
（2）牛肉膏蛋白胨    多于
（3）不能    缺少植物激素（或缺少植物需要的各種營養(yǎng)）
（4）少    當(dāng)兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落（一個菌落可來源于一個或多個細胞，合理答案均可給分）
（5）剛果紅染色法   纖維素酶

點評 本題主要考查微生物的篩選與分離，意在強化相關(guān)實驗操作的過程，提高學(xué)生的實驗技能．