Question

【題目】蘇云金桿菌能產(chǎn)生具有殺蟲能力的毒素蛋白。下圖是轉(zhuǎn)毒素蛋白基因植物的重組DNA形成過程示意圖，據(jù)圖回答下列問題。

（1）將圖中①的DNA和質(zhì)粒用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，過程②需要用到 酶。

（2）假設(shè)圖中質(zhì)粒上BamHⅠ識別位點的堿基序列變?yōu)榱肆硪环N限制酶BclⅠ識別位點的堿基序列，現(xiàn)用BclⅠ和HindⅢ切割質(zhì)粒，那么該圖中①的DNA右側(cè)還能選擇BamHⅠ進(jìn)行切割嗎？ （填“能”或“不能”）。若上述假設(shè)成立，并成功形成重組質(zhì)粒，則重組質(zhì)粒__________（填“能”或“不能”）被BamHⅠ切開，_________（填“能”或“不能”）被HindⅢ切開。

（3）實際操作中最常用_____________法來獲得轉(zhuǎn)基因植物，種植轉(zhuǎn)基因植物，它所攜帶的目的基因可能傳遞給非轉(zhuǎn)基因植物，造成基因污染，把目的基因?qū)�入植物的_______DNA中，就可以有效避免基因污染，原因是_______________。

Answer 1

【答案】（1）DNA連接酶

（2）能 能 不能

（3）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 葉綠體（線粒體/細(xì)胞質(zhì)） 葉綠體（線粒體/細(xì)胞質(zhì)）中的基因不會通過花粉傳給下一代

【解析】（1）由題意可知過程②是構(gòu)建基因表達(dá)載體，要將目的基因和運載體相連，所以應(yīng)用DNA連接酶。

（2）由酶切位點識別序列可知BclI切割后會產(chǎn)生-GATC的黏性末端，能和BamHI切割的黏性末端進(jìn)行配對，所以能。該重組質(zhì)粒連接后仍然是GGATCC，所以能被BamHI切開。但不能再被HindIII切開。

（3）實際操作中最常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法來獲得轉(zhuǎn)基因植物，要防止基因污染應(yīng)將目的基因?qū)�入到植物的線粒體或葉綠體的DNA中，因為受精時只有精子的細(xì)胞核與卵細(xì)胞結(jié)合，所以這樣就不會通過花粉傳遞給下一代。