Question

【題目】下圖表示基因工程中構建生產人乳鐵蛋白的重組載體。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因,ampR表示氨芐青霉素抗性基因,BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直線所示為三種限制酶的酶切位點。圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體,需用幾種限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因?篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含哪種抗生素的培養(yǎng)基上進行?(　　)

A. 1種　四環(huán)素

B. 2種　氨芐青霉素

C. 1種　氨芐青霉素

D. 2種　四環(huán)素

Answer 1

【答案】B

【解析】外源DNA分子上含有限制酶BamHI、HindIII、SmaI的切割位點，其中限制酶SmaI的切割位點位于目的基因上，所以獲取目的基因和構建基因表達載體時，應用HindⅢ和BamHⅠ2種限制酶。用限制酶HindⅢ和BamHⅠ切割質粒后，會破壞質粒上的四環(huán)素抗性基因tetR，但不會破壞氨芐青霉素抗性基因ampR，因此篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行。因此，B項正確，A、C、D項錯誤。