Question

5．某科研團(tuán)隊(duì)利用植物細(xì)胞工程技術(shù)，把基因序列已知的抗除草劑（Bar）基因?qū)�入原生質(zhì)體獲得抗除草劑大豆．請(qǐng)回答下列相關(guān)問題：

（1）對(duì)于已獲得的Bar基因可以用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增．圖中的a過程通常使用相同的限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶，使目的基因與載體連接形成重組DNA．
（2）在b過程中，獲得原生質(zhì)體除了需要纖維素酶和果膠酶，還需要用到的試劑是（較高濃度的）甘露醇．
（3）成功導(dǎo)入重組DNA的原生質(zhì)體經(jīng)脫分化形成Ⅰ愈傷組織，進(jìn)而生長發(fā)育成植株．下列不屬于Ⅰ細(xì)胞應(yīng)具有的特征是D．
A．薄壁細(xì)胞       B．細(xì)胞質(zhì)豐富           C．液泡小        D．細(xì)胞核小
（4）若要判斷轉(zhuǎn)基因抗除草劑大豆是否成功，比較簡便的檢測(cè)方法是用一定濃度的除草劑噴灑，觀察轉(zhuǎn)基因大豆的生長情況．

Answer 1

分析 分析題圖：圖中a為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，b為去除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體的過程，c為將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程，d為再生新的細(xì)胞壁的過程，e為脫分化過程，f為再分化過程．

解答 解：（1）PCR技術(shù)可在體外大量擴(kuò)增目的基因；圖中a為基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程首先需要用限制酶切割外源DNA和運(yùn)載體，其次需要用DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組DNA．
（2）用酶混合液處理植物細(xì)胞時(shí)，酶混合液中含有適宜濃度的甘露醇，其作用是細(xì)胞內(nèi)外的滲透壓，防止細(xì)胞吸水脹破．
（3）成功導(dǎo)入重組DNA的原生質(zhì)體經(jīng)脫分化形成Ⅰ愈傷組織，進(jìn)而生長發(fā)育成植株．愈傷組織的特點(diǎn)：高度液泡化，是由無定形狀態(tài)薄壁細(xì)胞組成的排列疏松、無規(guī)則的組織（色淺）．
（4）若要判斷轉(zhuǎn)基因抗除草劑大豆是否成功，比較簡便的檢測(cè)方法是用一定濃度的除草劑噴灑，觀察轉(zhuǎn)基因大豆的生長情況．
故答案為：
（1）PCR    限制性核酸內(nèi)切     
（2）（較高濃度的）甘露醇     
（3）愈傷組織    D
（4）用一定濃度的除草劑噴灑，觀察轉(zhuǎn)基因大豆的生長情況

點(diǎn)評(píng) 本題考查結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．