Question

【題目】多發(fā)性硬化癥是一種由纖維蛋白滲入大腦引發(fā)的神經(jīng)系統(tǒng)疾病�？蒲腥藛T制備了抗纖維蛋白的單克隆抗體（5B8）。請回答問題。

（1）科研人員將纖維蛋白作為________注射到小鼠體內(nèi)，激活________過程產(chǎn)生抗體。

（2）科研人員利用上述小鼠制備了抗纖維蛋白的單克隆抗體（5B8），請說明制備的基本技術(shù)流程____________。

（3）活性氧（ROS）是氧分子正常代謝的副產(chǎn)物，但當(dāng)吞噬細(xì)胞中的ROS大量產(chǎn)生并釋放時(shí)，會(huì)毒害周圍神經(jīng)元。NADPH氧化酶是催化細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生ROS的主要酶。為研究單克隆抗體5B8的作用機(jī)制，研究人員檢測了5B8處理后，吞噬細(xì)胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，結(jié)果如圖。

①由于細(xì)胞中GADPH蛋白________，在實(shí)驗(yàn)中可作為標(biāo)準(zhǔn)參照，排除實(shí)驗(yàn)操作等無關(guān)變量對結(jié)果的影響。

②對比____________組檢測結(jié)果，可知纖維蛋白提高了吞噬細(xì)胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，使其對神經(jīng)元產(chǎn)生毒害。

③另有試驗(yàn)結(jié)果顯示，單克隆抗體5B8對多發(fā)性硬化癥有明顯療效。請根據(jù)上述結(jié)果分析其具有療效的原因____________。

Answer 1

【答案】抗原 體液免疫 注射了纖維蛋白的小鼠脾臟中獲取的B細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合獲得雜交細(xì)胞；用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選；對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆和抗體檢測；在體外環(huán)境或小鼠腹腔內(nèi)，培養(yǎng)篩選后獲得的雜交瘤細(xì)胞；從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體5B8。（畫圖和文字描述均可） 表達(dá)量穩(wěn)定且含量豐富 1和2 單克隆抗體5B8與纖維蛋白結(jié)合，可以降低吞噬細(xì)胞NADPH氧化酶的量，進(jìn)而降低ROS產(chǎn)量，從而減小對神經(jīng)元的傷害，因此起到治療多發(fā)性硬化癥的作用。

【解析】

單克隆抗體的制備過程是：對小動(dòng)物注射抗原，從該動(dòng)物的脾臟中獲取效應(yīng)B細(xì)胞，將效應(yīng)B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞，克隆化培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞（體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)），最后獲取單克隆抗體。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有：物理法（離心、振動(dòng)）、化學(xué)法（聚乙二醇）、生物法（滅活的病毒）。

（1）科研人員將纖維蛋白作為抗原注射到小鼠體內(nèi)，激活體液免疫過程，產(chǎn)生的漿細(xì)胞合成并分泌抗體。

（2）制備抗纖維蛋白的單克隆抗體5B8的基本技術(shù)流程為：先從注射了纖維蛋白的小鼠脾臟中獲取的B細(xì)胞與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合獲得雜交細(xì)胞；用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選；對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆和抗體檢測；在體外環(huán)境或小鼠腹腔內(nèi)，培養(yǎng)篩選后獲得的雜交瘤細(xì)胞；從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中提取單克隆抗體5B8。

（3）①由于細(xì)胞中GAPDH蛋白表達(dá)量穩(wěn)定且含量豐富，在實(shí)驗(yàn)中可作為標(biāo)準(zhǔn)參照，排除實(shí)驗(yàn)操作等無關(guān)變量對結(jié)果的影響。

②對比1和2組檢測結(jié)果，可知纖維蛋白提高了吞噬細(xì)胞中NADPH氧化酶和ROS的含量，使其對神經(jīng)元產(chǎn)生毒害。

③單克隆抗體5B8與纖維蛋白結(jié)合，可以降低吞噬細(xì)胞NADPH氧化酶的量，進(jìn)而降低ROS產(chǎn)量，從而減小對神經(jīng)元的傷害，因此單克隆抗體5B8對多發(fā)性硬化癥有明顯療效。