Question

17．利用基因工程技術(shù)將突變的IPA1基因轉(zhuǎn)入水稻細(xì)胞中從而獲得某水稻新品種．
（1）培育該轉(zhuǎn)基因水稻新品種的核心是構(gòu)建重組DNA分子，該過(guò)程需要用到的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶．
本實(shí)驗(yàn)中常用CaCl₂處理土壤農(nóng)桿菌其目的是，增加其細(xì)胞壁的通透性，便于重組質(zhì)粒的導(dǎo)入．
（2）在含目的基因的水稻細(xì)胞培育成植株過(guò)程中可以將含有愈傷組織的培養(yǎng)物放在搖床上，通過(guò)液體懸浮培養(yǎng)分散成單細(xì)胞．在該水稻的培養(yǎng)過(guò)程中，相關(guān)敘述正確的是D
A．配制只含有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基，倒在滅菌試管中凝固成半固體 
B．從滅菌的根、莖或葉上切取一些小組織塊，進(jìn)行培養(yǎng) 
C．這種單細(xì)胞具有細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡大、細(xì)胞核大的特征
D．水稻體細(xì)胞與這種單細(xì)胞的全能性表達(dá)程度大不相同
（3）利用水稻細(xì)胞制備原生質(zhì)體時(shí)，需在0.5〜0.6mol/L的甘露醇溶液中進(jìn)行處理，該溶液濃度與水稻細(xì)胞中的細(xì)胞液濃度相當(dāng)．

Answer 1

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體，該過(guò)程首先要用同種限制酶切割目的基因和外源DNA分子，其次需要用DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組DNA分子．本實(shí)驗(yàn)中常用CaCl₂處理土壤農(nóng)桿菌其目的是，增加其 細(xì)胞壁的通透性，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，便于重組質(zhì)粒的導(dǎo)入．
（2）在含目的基因的水稻細(xì)胞培育成植株過(guò)程中可以將含有愈傷組織的培養(yǎng)物放在搖床上，通過(guò)液體懸浮培養(yǎng)分散成單細(xì)胞．
A．配制含有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的培養(yǎng)基，A 錯(cuò)誤；
B．從消毒的根、莖或葉上切取一些小組織塊，B錯(cuò)誤；
C．這種單細(xì)胞具有細(xì)胞質(zhì)豐富、液泡小、細(xì)胞核大的特征，C錯(cuò)誤；
D．水稻體細(xì)胞比這種單細(xì)胞的全能性表達(dá)程度要小，D正確．
故選：D．
（3）利用水稻細(xì)胞制備原生質(zhì)體時(shí)，需在0.5〜0.6mol/L的甘露醇溶液中進(jìn)行處理，該溶液濃度與水稻細(xì)胞中的細(xì)胞液濃度相當(dāng)，這樣可以維持一定的滲透壓，保持原生質(zhì)體的形態(tài)．
故答案為：
（1）重組DNA分子      限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶（寫(xiě)全得分）     細(xì)胞壁
（2）液體懸浮     D 
（3）細(xì)胞液

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．