Question

8．科學(xué)家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)．過程如圖，據(jù)圖回答：
（1）過程①表示采取反轉(zhuǎn)錄法的方法來獲取目的基因．
（2）形成圖中②含有目的基因的DNA（重組質(zhì)粒）需要的酶包括：限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶．
（3）基因工程中常用的載體除有質(zhì)粒外，還有λ噬菌體的衍生物（動植物病毒）．重組質(zhì)粒包括啟動子、目的基因、標(biāo)記基因及終止子等部分．
（4）圖中③過程用人工方法，使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi)，一般將受體大腸桿菌用氯化鈣處理，使細(xì)胞成為感受態(tài)細(xì)胞，從而使含有目的基因的重組質(zhì)粒容易進(jìn)入受體細(xì)胞．檢測大腸桿菌B是否導(dǎo)入了質(zhì)�；蛑亟M質(zhì)粒，可采用的方法是將得到的大腸桿菌B涂布在含有（氨芐）青霉素的培養(yǎng)基上，若細(xì)菌能夠生長，說明：已導(dǎo)入了重組質(zhì)粒或普通質(zhì)粒A，理由：普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒都含有抗氨芐青霉素的基因．
（5）基因工程的第四步中，檢測目的基因是否插入受體細(xì)胞的染色體DNA上、檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，用到的技術(shù)分別是DNA分子雜交技術(shù)、抗原-抗體雜交技術(shù)．

Answer 1

分析 分析題圖：圖示表示利用基因工程培育抗蟲棉過程，其中①表示通過人工合成法獲取目的基因；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；③表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞．

解答 解：（1）圖中①表示采用反轉(zhuǎn)錄法（人工合成法）獲取目的基因．
（2）②是基因表達(dá)載體，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，首先要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運(yùn)載體，其次要用DNA連接酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組DNA．
（3）基因工程中常用的載體除有質(zhì)粒外，還有λ噬菌體的衍生物、動植物病毒．重組質(zhì)粒包括啟動子、目的基因、標(biāo)記基因及終止子等部分．
（4）將目的基因?qū)�入大腸桿菌常用感受態(tài)細(xì)胞法，即用氯化鈣處理，使細(xì)胞成為感受態(tài)細(xì)胞，從而使含有目的基因的重組質(zhì)粒容易進(jìn)入受體細(xì)胞．質(zhì)粒上有2個(gè)標(biāo)記基因，但抗四環(huán)素基因被插入的目的基因破壞掉，因此剩下的是抗氨芐青霉素抗性基因，如果在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長，說明已經(jīng)導(dǎo)入了重組質(zhì)�；蚱胀ㄙ|(zhì)粒A，因?yàn)槠胀ㄙ|(zhì)粒和重組質(zhì)粒都含有抗氨芐青霉素的基因．
（5）基因工程的第四步中，檢測目的基因是否插入受體細(xì)胞的染色體DNA上、檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，用到的技術(shù)分別是DNA分子雜交技術(shù)、抗原-抗體雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）反轉(zhuǎn)錄法    
（2）限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶
（3）λ噬菌體的衍生物（動植物病毒）  目的基因  標(biāo)記基因
（4）氯化鈣  感受態(tài)細(xì)胞  （氨芐）青霉素  普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒都含有抗氨芐青霉素的基因
（5）DNA分子雜交技術(shù)    抗原-抗體雜交技術(shù)

點(diǎn)評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因棉花培育過程圖，考查基因工程、植物組織培養(yǎng)等知識，要求考生識記基因工程的工程及操作步驟，能根據(jù)限制酶識別序列選擇合適的限制酶，并能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，再結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題．