Question

【題目】回答下列關于遺傳信息的表達和生物工程問題：

圖（1）為限制酶EcoRⅠ的識別序列，圖（2）表示質粒，圖（3）表示目的基因及限制酶切點。請回答下列問題：

（1）圖（1）中限制酶EcoRⅠ的特點是______。

（2）為了使目的基因和質粒定向連接并且有利于受體細胞的篩選，提高重組效率，應該選擇的限制酶是______。

（3）如果大腸桿菌是受體細胞，則其體內應不含______基因，以利于篩選出含重組質粒的受體菌。按此要求，成功導入重組質粒的大腸桿菌具有的特點是______

A．能在含有青霉素的培養(yǎng)基上生長

B．能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長

C．在含有青霉素的培養(yǎng)基上不能生長

D．在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能生長

（4）為了獲得含重組質粒的單個大腸桿菌的菌落，常用的接種方法是______。

（5）若該目的基因合成的是脂肪酶，在生產提純分泌型脂肪酶工程中，加入硫酸銨使酶與其他雜質分離，該過程屬于酶分離提純步驟中的______。

A．過濾酶

B．干燥酶

C．層析酶

D．沉淀酶

Answer 1

【答案】特異性識別和切割DNA PstⅠ、EcoRⅠ 抗四環(huán)素 B、C 平板劃線法或稀釋涂布平板法 D

【解析】

1、基因工程又叫DNA重組技術，是指按照人們的意愿，進行嚴格的設計，并通過體外DNA重組和轉基因等技術，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產品。

2、基因工程的工具：

（1）限制酶：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。

（2）DNA連接酶：連接的是兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。

（3）運載體：常用的運載體：質粒、噬菌體的衍生物、動植物病毒。

（1）圖（1）中限制酶EcoRⅠ的特點是特異性識別和切割DNA（特異性識別GAAATTC和切割DNA中鳥嘌呤脫氧核苷酸和腺嘌呤脫氧核苷酸之間的鍵）。

（2）為了使目的基因和質粒定向連接并且有利于受體細胞的篩選，提高重組效率，又使四環(huán)素抗性基因不被破壞，應該選擇的限制酶是 PstⅠ、EcoRⅠ。

（3）如果大腸桿菌是受體細胞，則其體內應不含抗四環(huán)素基因，以利于篩選出含重組質粒的受體菌。按此要求，成功導入重組質粒的大腸桿菌具有的特點是能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生長但在含有青霉素的培養(yǎng)基上不能生長。

（4）為了獲得含重組質粒的單個大腸桿菌的菌落，常用的接種方法是平板劃線法或稀釋涂布平板法。

（5）生產提純分泌型脂肪酶工程中，加入硫酸銨使酶與其他雜質分離，該過程屬于酶分離提純步驟中的沉淀酶