Question

14．如表是4組生物學(xué)實驗培養(yǎng)基．請回答下列問題

組別	培養(yǎng)基
a	無機(jī)鹽、蔗糖、維生素和甘氨酸等有機(jī)物、瓊脂
b	葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、酚紅、水、瓊脂糖
c	蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水、瓊脂
d	葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動物血清等

（1）進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)選用d培養(yǎng)基（填組別）．在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時，首先，將動物體內(nèi)的一部分組織取出，經(jīng)過機(jī)械消化或胰蛋白酶（或“胰酶”）消化，使其分散成單個的細(xì)胞．如果是培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞，則首先需要在培養(yǎng)皿底部制備一層胚胎成纖維細(xì)胞，稱為飼養(yǎng)層，這層細(xì)胞具有抑制分化，促進(jìn)生長發(fā)育特點．胚胎干細(xì)胞是一種未分化細(xì)胞，具有發(fā)育的全能性和二倍體核型．
（2）分離以尿素為氮源的細(xì)菌應(yīng)選用培養(yǎng)基b．在含有酶的細(xì)菌菌落周圍會出現(xiàn)脲紅色環(huán)帶，這是由于尿素被分解產(chǎn)生的NH₃使PH升高，酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化．變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力越強(qiáng)．該實驗用的分離方法是涂布分離法．
（3）用培養(yǎng)基a進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，則培養(yǎng)基還需要加入植物生長調(diào)節(jié)劑（或“植物激素”）．
（4）下表對應(yīng)關(guān)系中，錯誤的是A

選項	對象	方法
A	培養(yǎng)基c	G6玻璃砂漏斗
B	培養(yǎng)皿	高壓蒸汽滅菌
C	超凈臺	紫外燈照射
D	自然生長的莖段	70%酒精和5%次氯酸鈉

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽．分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基．
2、選擇培養(yǎng)基的原理是：不同微生物在代謝過程中所需要的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境不同．有的適于酸性環(huán)境，有的適于堿性環(huán)境；例如從土壤中分離放線菌時，可在培養(yǎng)基中加入10%的酚數(shù)滴，抑制細(xì)菌和真菌的生長；如培養(yǎng)酵母菌和霉菌，可在培養(yǎng)基中加入青霉素；培養(yǎng)金黃色葡萄球菌，可在培養(yǎng)基中加入高濃度的食鹽．
3、實驗室中目的菌株的篩選
①原理：人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度．pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長．
培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理：培養(yǎng)基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源．缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物
②方法：能合成脲酶的細(xì)菌才能分解尿素．配制以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，能夠生長的細(xì)菌就是能分解尿素的細(xì)菌．
③為檢測尿素分解菌的存在與否，在以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，如果存在尿素分解菌，則指示劑將變紅色．

解答 解：（1）進(jìn)行動物細(xì)胞培養(yǎng)要選用液體培養(yǎng)基，因此應(yīng)選擇d培養(yǎng)基．在進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時，首先，將動物體內(nèi)的一部分組織取出，經(jīng)過機(jī)械消化或胰蛋白酶（或“胰酶”）消化，使其分散成單個的細(xì)胞．如果是培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞，則首先需要在培養(yǎng)皿底部制備一層胚胎成纖維細(xì)胞，稱為飼養(yǎng)層，這層細(xì)胞具有抑制分化，促進(jìn)生長發(fā)育特點．胚胎干細(xì)胞是一種未分化細(xì)胞，具有發(fā)育的全能性和二倍體核型．
（2）分離以尿素為氮源的細(xì)菌應(yīng)選用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基，因此應(yīng)選擇培養(yǎng)基b．在含有酶的細(xì)菌菌落周圍會出現(xiàn)脲紅色環(huán)帶，這是由于尿素被分解產(chǎn)生的NH₃使PH升高，酚紅指示劑產(chǎn)生顏色變化，變色區(qū)域越大，表明該菌株利用尿素的能力越強(qiáng)．該實驗用的分離方法是涂布分離法．
（3）進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時，需要在培養(yǎng)基中加入植物生長調(diào)節(jié)劑（或“植物激素”）．
（4）A、若要用于分離以尿素為氮源的微生物，培養(yǎng)基中應(yīng)不含其它氮源，并且培養(yǎng)基應(yīng)為加入瓊脂的固體培養(yǎng)基，因此可選擇標(biāo)號b做基本培養(yǎng)基，加上封口膜后滅菌，待冷卻后加入經(jīng)過G6玻璃漏斗過濾（使之無菌）的尿素溶液，搖勻待用，A錯誤；
B、培養(yǎng)皿應(yīng)該選用高壓蒸汽滅菌法，B正確；
C、超凈臺應(yīng)該用紫外燈照射來消毒，C正確；
D、自然生長的莖段應(yīng)該用70%酒精和5%次氯酸鈉進(jìn)行消毒，D正確．
故選：A．
故答案為：
（1）d    胰蛋白酶（或“胰酶”）飼養(yǎng)層抑制分化，促進(jìn)生長發(fā)育    發(fā)育的全能      二倍體
（2）脲紅色環(huán)帶   NH₃越強(qiáng)涂布分離法
（3）植物生長調(diào)節(jié)劑（或“植物激素”）
（4）A

點評 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記無菌技術(shù)，特別是實驗室常用的消毒和滅菌方法；掌握接種微生物常用的兩種方法，能結(jié)合表中信息準(zhǔn)確答題．