Question

【2010·浙江三校聯(lián)考】腫瘤是危害人類健康的重要疾病。某醫(yī)院病理室為確診一患者的腫瘤是否惡性，切取了其一小塊腫瘤組織進行培養(yǎng)。請回答下列有關問題：

（1）進行體外培養(yǎng)時，腫瘤組織必須先用____________________等處理成單個細胞。

（2）在培養(yǎng)中若要測量腫瘤細胞的數(shù)量，可以將待測樣品與等量的已知含量的紅細胞懸浮液混勻，涂布在載玻片上，經(jīng)處理后觀察。請設計一張用于記錄觀察數(shù)據(jù)的記錄表，并推導出計算腫瘤細胞數(shù)目的公式。

①觀察數(shù)據(jù)記錄表：

②腫瘤細胞數(shù)的計算公式：____________________

（3）若在腫瘤細胞培養(yǎng)液中加入用3H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸，短暫培養(yǎng)一段時間后，洗去3H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸。使在該段時間內(nèi)已處于DNA復制期不同階段的全部細胞中DNA被3H標記，而當時處于其它時期的細胞則不帶標記。不同時間取樣做細胞放射性自顯影，找出正處于有絲分裂的分裂期細胞，計算其中帶3H標記的細胞占有絲分裂細胞的百分數(shù)。得到下圖（圖1～圖4中橫軸為時間，縱軸為帶標記細胞占總細胞數(shù)的百分數(shù)）：

①圖2中a點開始檢測到帶3H標記分裂期細胞，則o-a為                                         期，理由是：                                   。

②圖2中b點帶3H標記分裂期細胞數(shù)開始達到最大值，則a-b段表示                                期，理由是：                                   。

③圖3中c點時，帶標記的細胞百分數(shù)開始下降，則a-c段表示哪些時期：                      。

④此后，帶標記的分裂期細胞數(shù)逐漸減少，直到消失，到第二次出現(xiàn)帶有標記的細胞數(shù)時為圖表中e點，則一個完整的細胞周期為：                            。

（4）某科研單位研制出一種新型藥物X，據(jù)說對此類腫瘤有較好的療效，能起到抑制腫瘤細胞分裂的作用。研究者設計了以下方案加以驗證，請將實驗步驟補充完整：將腫瘤細胞懸浮液分成等細胞數(shù)的A、B兩組。A組加入3H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸，B組應加入                。相同條件下培養(yǎng)一段時間后，洗去培養(yǎng)液，把兩組細胞做相應的處理，分別檢測兩組細胞的放射性強度。如果出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象為                         ，則說明此藥物的療效好。

Answer 1

（1）胰蛋白酶

（2）①觀察數(shù)據(jù)記錄表：

（要求：視野3個以上；要有平均值、紅細胞數(shù)、腫瘤細胞數(shù)記載欄。以上項目不全不給分）

	視野1	視野2	視野3	視野4	視野5	平均值
紅細胞數(shù)
腫瘤細胞數(shù)

②腫瘤細胞數(shù)的計算公式為ab/c

（a：紅細胞懸浮液中的紅細胞數(shù)；b觀察到的視野中腫瘤細胞數(shù)的平均值；c：觀察到的視野中的紅細胞數(shù)的平均值）（無說明不給分）

（3）① G2       理由是：處于DNA復制最后階段的細胞最先出現(xiàn)標記。

       ② 分裂期   理由是：a點后，原處于DNA復制期最后階段的細胞完成有絲分裂。

 ③ S  G2  分裂期(不全不給分)  

       ④ a-e 

（4）等量的3H標記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸和藥物

 A組細胞的放射性強度大于B組細胞