Question

【題目】內皮素（ET）是一種含21個氨基酸的多肽，與高血壓、糖尿病、癌癥等有著密切聯(lián)系。研究發(fā)現(xiàn)內皮素功能異常與內皮素主要受體ETA有關，科研人員通過構建表達載體，實現(xiàn)了ETA基因在細胞中高效表達。其過程如下（圖中SNAP基因是一種熒光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的識別序列為CCC＇GGG，限制酶XhoI的識別序列為C＇TCGAG）。據圖回答下列問題：

（1）圖中ETA基因能夠在大腸桿菌細胞內表達的原因是 。

（2）過程①中需要用 酶處理,過程③中，限制酶Xho I切割DNA形成的黏性末端是 。用兩種限制酶切割，獲得不同的黏性末端，其主要目的是 。

（3）圖中的基因表達載體至少還缺少 ，鑒定ETA基因是否導入受體細胞需要用放射性同位素或熒光分子標記的 作探針。

（4）已知熒光顯微鏡可以通過檢測熒光的強度來判斷SNAP基因是否表達及表達量。因此，利用SNAP基因與ETA基因結合構成融合基因，目的是 ．

（5）人皮膚黑色素細胞上有內皮素的特異受體，內皮素與黑色素細胞膜上的受體結合后，會刺激黒色素細胞的增殖、分化并激活酪氨酸酶的活性，從而使黑色素增加。美容時可以利用注射ETA達到美白祛斑效果，原因是 ，從而抑制了黑色素細胞的增殖和黑色素的形成。

Answer 1

【答案】（1）所有生物共用一套遺傳密碼

（2）逆轉錄 —AGCT（或—GAGCT—C）

使目的基因定向連接到載體上（避免目的基因及載體的任意連接）

（3）終止子 ETA基因

（4）檢測ETA基因能否表達及表達量

（5）ETA能與內皮素結合（減少了內皮素與黑色素細胞膜上內皮素受體的結合）

【解析】

試題分析：（1）目的基因能夠在受體細胞表達的原因是不同的生物共用一套遺傳密碼。

（2）據圖分析，過程①是RNA形成DNA的逆轉錄過程，需要逆轉錄酶的催化。過程③中限制酶XhoI切割DNA形成的黏性末端是—AGCT。用兩種限制酶切割，獲得不同的黏性末端，可以避免目的基因及載體的任意連接，使目的基因定向連接到載體上。

（3）圖中基因表達載體含有啟動子、標記基因和目的基因，沒有終止子。鑒定ETA基因是否導入受體細胞需要用放射性同位素或熒光分子標記的ETA基因作探針。

（4）檢測SNAP基因是否表達及表達量時，利用SNAP基因與ETA基因結合構成融合基因。

（5）ETA能與內皮素結合，減少了內皮素與黑色素細胞膜上內皮素受體的結合，可以抑制了黑色素細胞的增殖和黑色素的形成。