Question

【題目】回答下列(一)、(二)小題：

(一)下面是有關(guān)食醋制作的實(shí)驗(yàn)，請回答：

(1)若以大米為原料經(jīng)三步發(fā)酵可以制作食醋：

第一步：大米經(jīng)蒸熟、冷卻后加入淀粉酶，將原料中的淀粉分解成________(填中間產(chǎn)物)，然后進(jìn)一步水解成葡萄糖，這一過程可用________(填淀粉指示劑)來檢測，因?yàn)樵撛噭┯龅矸鄢仕{(lán)色，遇上述中間產(chǎn)物呈紅色。

第二步：用酵母菌將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乙醇，這一發(fā)酵過程中，玻璃發(fā)酵瓶不應(yīng)完全密閉的主要原因是_____________________________________________________。

第三步：用________菌將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸，這一過程是否需要氧氣：________。

(2)若以葡萄為原料，將葡萄榨成汁后裝入相應(yīng)的發(fā)酵瓶中，在溫度等適宜的條件下進(jìn)行發(fā)酵，如下圖所示。

則圖中實(shí)驗(yàn)操作的錯誤之處是____________________________________________________。

(3)借助顯微鏡對酵母菌進(jìn)行計數(shù)，下列會影響計數(shù)準(zhǔn)確性的操作是________。

A．壓在方格線上的細(xì)胞只計左線和上線上的酵母菌數(shù)

B．用滴管取1滴培養(yǎng)液到血細(xì)胞計數(shù)板的方格區(qū)，蓋上蓋玻片，進(jìn)行計數(shù)

C．如果酵母菌有芽體，因沒有分離成兩個子體，要以一個計數(shù)

D．方格內(nèi)酵母菌總數(shù)量應(yīng)不少于300個

(二)人組織纖溶酶原激活物(htPA)是一種重要的藥用蛋白，可在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中獲得。流程如下：

請回答：

(1)htPA基因與質(zhì)粒通常用同種__________________切割，再通過__________酶連接構(gòu)建重組質(zhì)粒。

(2)為獲取更多的卵(母)細(xì)胞，通常對供體母羊進(jìn)行____________處理。卵(母)細(xì)胞在體外培養(yǎng)成熟，再與經(jīng)過____________處理的精子完成受精作用。體外受精卵還需經(jīng)過____________培養(yǎng)，然后再移植，代孕產(chǎn)仔。最后檢測篩選，下列檢測結(jié)果中，作為培育成功標(biāo)志的是________。

A．體細(xì)胞中檢測到htPA基因

B．體細(xì)胞中檢測到htPA基因的mRNA

C．羊奶中檢測到htPA

D．羊奶中檢測到蛋白質(zhì)含量明顯增加

(3)若快速繁殖轉(zhuǎn)htPA基因羊，下列胚胎工程技術(shù)中沒有直接涉及的是________。

A．胚胎體外培養(yǎng) B．胚胎移植

C．胚胎分割 D．胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)

Answer 1

【答案】 糊精 KII2 發(fā)酵過程會產(chǎn)生大量的二氧化碳，使瓶內(nèi)壓力升高，若完全密閉，可能引起爆裂 醋化醋桿 是 未夾住發(fā)酵瓶的進(jìn)氣管 C 限制性核酸內(nèi)切酶 DNA連接 超數(shù)排卵 獲能 (早期)胚胎體外 C D

【解析】試題分析：本題結(jié)合轉(zhuǎn)htPA基因母羊的培育過程圖，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、操作工具及操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。

（一）(1)第一步：大米經(jīng)蒸熟、冷卻后加入淀粉酶，將原料中的淀粉分解成中間產(chǎn)物糊精，然后進(jìn)一步分解成葡萄糖，這一過程可用KII2 來檢測，因?yàn)樵撛噭┯龅矸鄢仕{(lán)色，遇上述中間產(chǎn)物呈紅色。第二步：用酵母菌將葡萄糖轉(zhuǎn)化成乙醇，這一發(fā)酵過程中，該過程中除了產(chǎn)生酒精，還會產(chǎn)生大量的CO2，使瓶內(nèi)壓力升高，使瓶內(nèi)壓力升高而可能引起爆裂，因此操作玻璃發(fā)酵瓶不應(yīng)完全密閉。

第三步：用醋酸菌將乙醇轉(zhuǎn)化成乙酸，由于醋酸菌是嗜氧菌，因此該過程需要消耗氧氣。

（2）果酒發(fā)酵時需要無氧環(huán)境，因此甲圖中的錯誤是未夾住發(fā)酵瓶的進(jìn)氣管。

（3）用血細(xì)胞計數(shù)板進(jìn)行計數(shù)時，壓在方格邊上的酵母菌，只能計數(shù)相鄰兩邊及其頂角的個體數(shù)，否則會產(chǎn)生誤差，A錯誤；對酵母菌計數(shù)時，應(yīng)該先震蕩均勻，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液用濾紙吸去，而不能直接將培養(yǎng)液滴到血細(xì)胞計數(shù)板的方格區(qū)，蓋上蓋玻片，進(jìn)行計數(shù)，B錯誤；用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌數(shù)量時酵母菌的芽體也作為個體計數(shù)，會使實(shí)驗(yàn)所得到數(shù)值比實(shí)際數(shù)值偏大，因此酵母菌有芽體，沒有分離成兩個子體，要以一個計數(shù)，C正確；方格內(nèi)酵母菌總數(shù)量大于300個，數(shù)量太多，細(xì)胞疊加在一起，會是讀數(shù)帶來誤差，D錯誤。

（二）（1）目的基因和運(yùn)載體需用同種限制性核酸內(nèi)切酶（或同種限制酶）切割，產(chǎn)生相同的粘性末端，通過DNA連接酶連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。

（2）為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，要對供體母羊注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵．采集的精子需要經(jīng)過獲能（處理），才具備受精能力。體外受精卵還需經(jīng)過胚胎體外培養(yǎng)，然后再移植，代孕產(chǎn)仔�；�因表達(dá)成功時可獲得目的基因的產(chǎn)物，既在轉(zhuǎn)htPA基因母羊的羊乳中檢測到htPA（或人組織纖溶酶原激活物），說明目的基因成功表達(dá)，故選C。

(3) 由于胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，因此可以利用胚胎干細(xì)胞快速培養(yǎng)繁殖轉(zhuǎn)htPA基因羊，故選D。