Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）早在北宋年間，我國(guó)就有紅棗酒釀造的相關(guān)記載，其基本工藝流程為：洗凈消毒—破碎榨汁—加曲發(fā)酵—過(guò)濾陳釀�；卮鹣铝袉�(wèn)題：

（1）消毒過(guò)程中可以用__________溶液浸泡適當(dāng)時(shí)間，再用清水沖洗。

（2）為獲得品質(zhì)較高的紅棗汁，可加入果膠酶，能生產(chǎn)果膠酶的微生物有__________，與細(xì)菌培養(yǎng)基不同，該微生物生長(zhǎng)要求的酸堿環(huán)境是__________。配制的培養(yǎng)基應(yīng)在高壓蒸汽滅菌__________（前/后）調(diào)節(jié)酸堿度。果汁制作后可用__________鑒別是否仍有較多果膠存在。

（3）在澄清果汁中加純種酵母液，在__________________條件下產(chǎn)生酒精和二氧化碳。待靜置一段時(shí)間后，用__________法取出上清液。

（二）人胰島素基因的克隆操作過(guò)程如右圖所示，其中mRNA逆轉(zhuǎn)錄形成的DNA稱為cDNA。回答下列問(wèn)題：

（1）提取分離組織細(xì)胞中的人胰島素mRNA時(shí)，最應(yīng)選擇________細(xì)胞，過(guò)程①②需要原料是________。

（2）通過(guò)將所有的cDNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，去感染細(xì)菌，可以建立包括目的基因在內(nèi)的__________，若使用質(zhì)粒載體，其上存在__________基因，有助于質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞中。此過(guò)程還可以使用_______作為載體。（A.動(dòng)物病毒 B.植物病毒 C.噬菌體）。

（3）除了上述方法外，還可以使用__________方法擴(kuò)增目的基因。不同的是，后者的目的基因若為人胰島素原基因，需要導(dǎo)入__________（填“真核”或“原核”）受體細(xì)胞中。

Answer 1

【答案】 高錳酸鉀 蘋果青霉（或黑曲霉） 中性偏酸 前 95%乙醇 無(wú)氧 虹吸 胰島β（細(xì)胞） （四種）脫氧核糖核苷酸 基因文庫(kù) 控制質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移的（基因） C PCR 真核

【解析】試題分析：本題考查微生物的培養(yǎng)與利用、果酒的制作、基因工程，考查對(duì)微生物培養(yǎng)、果酒制作、目的基因獲取原理的理解，解答此題，可根據(jù)真核細(xì)胞和原核細(xì)胞基因結(jié)構(gòu)的不同分析人胰島素原基因應(yīng)導(dǎo)入的受體細(xì)胞。

（1）紅棗的消毒可用高錳酸鉀溶液浸泡適當(dāng)時(shí)間。

（2）蘋果青霉（或黑曲霉）能生產(chǎn)果膠酶。細(xì)菌生長(zhǎng)要求中性偏堿的環(huán)境，霉菌生長(zhǎng)要求中性偏酸的環(huán)境。配制的培養(yǎng)基應(yīng)在高壓蒸汽滅菌前調(diào)節(jié)酸堿度。果膠不溶于乙醇，果汁制作后可用95%乙醇鑒別是否仍有較多果膠存在。

（3）酵母菌在無(wú)氧條件下通過(guò)無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳。發(fā)酵一段時(shí)間后，用虹吸法取出上清液。

（二）（1）人體細(xì)胞中只有胰島β細(xì)胞可表達(dá)胰島素基因，提取人胰島素mRNA時(shí)，最應(yīng)選擇胰島β細(xì)胞，過(guò)程①②為合成DNA的過(guò)程，需要（四種）脫氧核糖核苷酸為原料。

（2）通過(guò)將所有的cDNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，去感染細(xì)菌，可以建立包括目的基因在內(nèi)的基因（cDNA）文庫(kù)；若使用質(zhì)粒載體，其上應(yīng)存在控制質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)移的基因，有助于質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞中。噬菌體可侵染細(xì)菌，動(dòng)物病毒、植物病毒不能侵染細(xì)菌，此過(guò)程還可以使用噬菌體作為載體。

（3）用PCR技術(shù)可擴(kuò)增目的基因。PCR擴(kuò)增的人胰島素原基因含有內(nèi)含子序列，原核細(xì)胞中缺少轉(zhuǎn)錄后切除內(nèi)含子對(duì)應(yīng)序列的機(jī)制，因此應(yīng)將人胰島素原基因，需要導(dǎo)入真核受體細(xì)胞中。