Question

【題目】炭疽桿菌能引起人畜患炭疽病。對炭疽病疑似患者，可通過圖1所示鑒定炭疽桿菌的實驗進行確診。表1是培養(yǎng)炭疽桿菌的血瓊脂培養(yǎng)基成分，其中實驗組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌。

蛋白胨	10g
牛肉膏（粉）	3g
氯化鈉	5g
脫纖維養(yǎng)血（含多種生長因子）	50mL
瓊脂	15g
去離子水	1000mL

（1）表分析“血瓊脂培養(yǎng)基”屬于_______________（多選）

①通用培養(yǎng)基②選擇培養(yǎng)基③固體培養(yǎng)基④液體培養(yǎng)基

（2）由表可知，微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)有__________________________________。

為從炭疽病疑似患者體內(nèi)分離出炭疽桿菌，將采集到的患者皮膚膿胞滲出物稀釋后取0.1ml滴于培養(yǎng)基表面，用無菌涂布器（玻璃刮鏟）涂勻，這種接種方法稱為 ____________。圖2所示的四種菌落分布圖中，不可能由該方法得到的是_________________________。

（3）制備圖1中的液體培養(yǎng)基時需采取 _________方法滅菌，目的是_____________。

裝桶時不要裝的太擠，以免______________________________。

（4）據(jù)圖1分析，接種可疑菌后，經(jīng)35℃培養(yǎng)24小時，液體培養(yǎng)基變渾濁，原因是________________。對照組試管中應加入________________，與實驗組同時培養(yǎng)6小時后，若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組_____（填“高”或“低”），則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。此實驗依據(jù)的原理是_____________________________。

（5）對排除的疑似患者及易感人群，可采取的最有效的預防措施是___________________。

Answer 1

【答案】 ①③ 碳源、氮源、水、無機鹽（和生長因子） 稀釋涂布平板法 D 高壓蒸汽滅菌 殺死細菌及芽孢 妨礙蒸汽流通影響滅菌效果 炭疽桿菌大量繁殖 等量生理鹽水 低 實驗組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌，使細菌死亡，溶液變澄清 接種（炭疽桿菌）疫苗

【解析】分析：培養(yǎng)基的基本成分:水、無機鹽、碳源、氮源及特殊生長因子。無菌操作包括滅菌和消毒兩種方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；滅菌的方法有干熱滅菌、灼燒滅菌和高壓蒸汽滅菌。微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，常用來統(tǒng)計樣品活菌數(shù)目的方法是稀釋涂布平板法。微生物實驗室分離中配制培養(yǎng)基的操作步驟：計算→稱量→溶解→調(diào)pH→滅菌步驟。培養(yǎng)基的分類有按物理性質(zhì)分有固體、半固體、液體培養(yǎng)基；按用途分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。

（1）根據(jù)表格分析，該培養(yǎng)基含有牛肉膏、蛋白胨，是細菌的通用培養(yǎng)基，又因為含有瓊脂，為固體培養(yǎng)基。故選①③。

（2）由表可知，微生物生長所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)有四類：碳源、氮源、水、無機鹽（部分微生物需要特定的生長因子）。稀釋涂布平板法則是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分布涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。由圖中四種菌落分布情況可知，A、B和C是采用稀釋涂布平板法得到的，而D是采用平板劃線法得到的。

（3）制備圖1中的液體培養(yǎng)基時應該用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，以殺死微生物及芽孢。裝桶時不要裝的太擠，以免妨礙蒸汽流通影響滅菌效果。

（4）接種可疑菌后，經(jīng)35℃培養(yǎng)24小時，若液體培養(yǎng)基變渾濁，則可能就是炭疽桿菌大量繁殖。對照組試管中應加入等量生理鹽水，與實驗組同時培養(yǎng)6小時后，若實驗組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對照組低，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除。此實驗根據(jù)的原理是實驗組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌，使細菌死亡，溶液變澄清。

（5）對排除的疑似患者及易感人群，可接種炭疽桿菌疫苗，刺激機體產(chǎn)生相應抗體和記憶細胞而獲得沒免疫能力。