Question

天然釀酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶類(lèi)，用作發(fā)酵原料的淀粉需經(jīng)一系列復(fù)雜的轉(zhuǎn)化過(guò)程才能被利用。研究者從某絲狀真菌中獲取淀粉酶基因并轉(zhuǎn)入釀酒酵母菌，獲得的釀酒酵母工程菌可直接利用淀粉產(chǎn)生酒精。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
(1)將淀粉酶基因切割下來(lái)所用的工具是________，用_______將淀粉酶基因與載體拼接成新的DNA分子，此表達(dá)載體除目的基因外，必須含有______、_______和標(biāo)記基因。
(2)若要鑒定淀粉酶基因是否插入釀酒酵母菌，可采用的檢測(cè)方法是_______________，該項(xiàng)方法要用____________作探針進(jìn)行檢測(cè)；若要鑒定淀粉酶基因是否翻譯成淀粉酶，可采用_____方法檢測(cè)。
(3)采用PCR技術(shù)可對(duì)目的基因進(jìn)行體外擴(kuò)增。該反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含：擴(kuò)增緩沖液(含Mg²⁺)、水、4種dNTP、模板DNA、引物和____________。其中引物有_________種，實(shí)質(zhì)是_______，假如引物都用³H標(biāo)記，從理論上計(jì)算循環(huán)4次，所得DNA分子中含有³H標(biāo)記的占____。
(4)已知BarnHⅠ與BglⅡ的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)如下圖所示，用這兩種酶和DNA連接酶對(duì)一段含有數(shù)個(gè)BarnHⅠ和BglⅡ識(shí)別序列的DNA分子進(jìn)行反復(fù)的切割、連接操作，若干循環(huán)后_______序列明顯增多。

(5)基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)，__________卻能生產(chǎn)自然界不存在的新的蛋白質(zhì)，但最終還須通過(guò)改造基因來(lái)實(shí)現(xiàn)，原因是__________。

Answer 1

(1)限制性核酸內(nèi)切酶；DNA連接酶；啟動(dòng)子；終止子
(2)DNA分子雜交技術(shù)；用放射性同位素進(jìn)行標(biāo)記了的含目的基因的DNA片斷；抗原—抗體雜交法(或淀粉酶活性)
(3)Taq酶(耐高溫的或熱穩(wěn)定的DNA聚合酶)；2；DNA；100%
(4)
(5)蛋白質(zhì)工程；①基因控制蛋白質(zhì)的合成，改造基因即改造了蛋白質(zhì)；②改造的基因可以遺傳，直接改造的蛋白質(zhì)不能遺傳；③目前對(duì)大多數(shù)蛋白質(zhì)復(fù)雜的高級(jí)結(jié)構(gòu)還不清楚，所以改造基因比直接改造蛋白質(zhì)容易(答對(duì)其中一點(diǎn)即可)