Question

【題目】回答下列微生物相關(guān)問題

人工瘤胃模仿了牛羊等反芻動(dòng)物的胃，可用來發(fā)酵處理秸稈，提高秸稈的利用價(jià)值．為了增強(qiáng)發(fā)酵效果，研究人員擬從牛胃中篩選出纖維素酶高產(chǎn)菌株，并對其降解纖維素能力進(jìn)行研究．請回答下列問題：

（1）在樣品稀釋和涂布平板的步驟中，下列選項(xiàng)不需要的是

A．酒精燈 B．顯微鏡 C．培養(yǎng)皿 C．無菌水

（2）為了培養(yǎng)上述菌株，選擇的培養(yǎng)基配方是 （多選）

A．葡萄糖 B．纖維素 C．氮源 D．纖維素酶 E．瓊脂 F．無機(jī)鹽 G．蒸餾水

（3）在涂布平板時(shí)，滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多的原因是 ．

（4）剛果紅可以與纖維素形成紅色復(fù)合物，但并不與纖維素

降解產(chǎn)物纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)．研究人員在剛果

紅培養(yǎng)基平板上，篩到了幾株有透明降解圈的菌落（見右圖）．

圖中降解圈大小與纖維素酶的 有關(guān)．

圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是 （填圖中序

號）．

（5）研究人員用篩選到的纖維素酶高產(chǎn)菌株J1和J4，在不同溫度和pH條件下進(jìn)行發(fā)酵，測得發(fā)酵液中酶活性的結(jié)果見下圖，推測菌株 更適合用于人工瘤胃發(fā)酵．

（6）純化微生物培養(yǎng)時(shí)，可采用兩種接種方法．下圖為接種后微生物培養(yǎng)的效果圖，那么，獲得圖A效果的接種方法是 ，圖B效果的接種方法是 ．

（7）微生物在生命科學(xué)研究實(shí)踐中有著廣泛的用途，如作為人類健康第三大殺手的糖尿病的治療往往需要大量胰島素，但是人體胰島素含量很低，所以其生產(chǎn)中，一般通過基因工程手段，將化學(xué)方法人工合成的胰島素基因通過運(yùn)載體導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中，然后通過發(fā)酵工程快速生產(chǎn)大量的胰島素，下列有關(guān)敘述不正確的是 （多選）

A．快速生產(chǎn)的原因可能是因?yàn)榇竽c桿菌作為微生物，體積小，相對面積大，物質(zhì)交換速度快，代謝速率快，生產(chǎn)胰島素速度也快．

B．快速生產(chǎn)的原因可能是因?yàn)榇竽c桿菌作為原核生物可以邊轉(zhuǎn)錄邊翻譯．

C．快速生產(chǎn)的原因可能是因?yàn)榇竽c桿菌在繁殖時(shí)為無性生殖，繁殖速度快，短時(shí)間內(nèi)可以培養(yǎng)出大量有產(chǎn)生胰島素能力的菌種

D．大腸桿菌發(fā)酵生產(chǎn)的胰島素?zé)o需加工，可以直接應(yīng)用于臨床治療糖尿�。�

E．胰島素對Ⅱ型糖尿病的治療效果比對Ⅰ型糖尿病的治療效果更佳．

Answer 1

【答案】（1）B

（2）BCEFG

（3）培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果

（4）量與活性 ①

（5）J4

（6）稀釋涂布平板法 平板劃線法

（7）ED

【解析】

試題分析：（1）在樣品稀釋和涂布平板步驟中，需要使用酒精燈、培養(yǎng)皿無菌水等，但不需要顯微鏡，故選：B．

（2）根據(jù)題意可知，分離獲得產(chǎn)纖維素酶菌需要使用選擇培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，其中必須添加瓊脂．其中纖維素（秸桿）需要作為該培養(yǎng)基中的唯一碳源．還需要N源、水無機(jī)鹽、生長因子，故選：BCEFG．

（3）在涂布平板時(shí)，由于培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果，所以滴加到培養(yǎng)基表面的菌懸液量不宜過多．

（4）在剛果紅培養(yǎng)基平板上，篩到了幾株有透明降解圈的菌落，降解圈大小與纖維素酶的多少和活性有關(guān)．纖維素酶的量越多，活性越強(qiáng)，分解的纖維素越多，透明降解圈越大，所以圖中降解纖維素能力最強(qiáng)的菌株是①．

（5）由于胃部PH值較低，根據(jù)題意和圖示分析可知，發(fā)酵過程會(huì)產(chǎn)熱和產(chǎn)酸，J4菌株在較高溫度和酸性環(huán)境下酶的活性更高，所以推測菌株J4更適合用于人工瘤胃發(fā)酵．

（6）微生物培養(yǎng)的兩種接種方法有稀釋涂布平板法、平板劃線法和穿刺接種法，根據(jù)培養(yǎng)的效果圖可以斷定A是稀釋涂布平板法，B是平板劃線法．

（7）由于大腸桿菌是原核細(xì)胞，轉(zhuǎn)錄和翻譯同時(shí)進(jìn)行；無性生殖，繁殖速度快；體積小，相對面積大，物質(zhì)交換速度快，代謝速率快，因此大腸桿菌可作為轉(zhuǎn)基因的受體細(xì)胞，生產(chǎn)胰島素速度也快，ABC正確；

D．大腸桿菌發(fā)酵生產(chǎn)的胰島素需要加工處理，才可以應(yīng)用于臨床治療糖尿病，D錯(cuò)誤；

E、Ⅰ型糖尿病患者，胰島素分泌不足，胰島素受體正常；Ⅱ型糖尿病患者，胰島素分泌正常，胰島素受體不足．因此胰島素對Ⅰ型糖尿病的治療效果更佳，E錯(cuò)誤．

故選：DE．

故答案為：（1）B

（2）BCEFG

（3）培養(yǎng)基表面的菌懸液會(huì)出現(xiàn)積液，導(dǎo)致菌體堆積，影響分離效果

（4）量與活性 ①

（5）J4

（6）稀釋涂布平板法 平板劃線法

（7）ED