Question

【題目】[生物——選修3，現(xiàn)代生物科技專題]利用基因工程可以治療有基因缺陷的疾病�；�因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細胞�？蒲腥藛T利用胚胎干細胞(ES細胞)對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療，其技術(shù)流程如下圖：

(1)該項工程中目的基因的獲取可以利用PCR技術(shù)，依據(jù)_________設(shè)計引物，利用_______為原料在PCR儀中進行擴增。

(2)該項基因工程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是需要構(gòu)建含有Rag2基因的_______________.

(3)圖中步驟①中所選的卵母細胞應(yīng)處于___________期。而ES細胞一般從發(fā)育到________時期的

重組胚胎中分離獲取。

(4)轉(zhuǎn)化成功的ES細胞具有的結(jié)構(gòu)特點是_______________。為檢測Rag2基因的表達情況，可提取治療后小鼠骨髓細胞的蛋白質(zhì)，用抗Rag2蛋白的抗體進行________________。

Answer 1

【答案】Rag2基因的核苷酸序列4種脫氧核苷酸表達載體（重組質(zhì)粒）減數(shù)第二次分裂中（MⅡ中）囊胚體積小，細胞核大，核仁明顯，且具有目的基因抗原-抗體雜交

【解析】分析題圖：圖示是利用胚胎干細胞（ES細胞）對Rag2基因缺失小鼠進行基因治療的過程圖解，其中①表示核移植過程，②表示早期胚胎培養(yǎng)過程，③表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)�入受體細胞。

(1)引物的設(shè)計要根據(jù)要擴增的DNA序列來設(shè)計即Rag2基因的核苷酸序列，利用為4種脫氧核苷酸原料在PCR儀中進行擴增；

(2)該項基因工程的關(guān)鍵環(huán)節(jié)基因表達載體的構(gòu)建；

(3) 卵母細胞進入輸卵管，并停留在第2次成熟分裂中期，此時染色體都集中在赤道板位置，容易去除染色體，而且此時的細胞才具備受精能力，更容易接收外源染色體，故圖中步驟①中所選的卵母細胞應(yīng)處于MII期。而ES細胞一般從發(fā)育到囊胚時期的重組胚胎中分離獲取。

(4)轉(zhuǎn)化成功的ES細胞具有的結(jié)構(gòu)特點是體積小，細胞核大，核仁明顯，且具有目的基因。基因表達的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)，可用抗原-抗體雜交技術(shù)來鑒定。