Question

圖1表示含有目的基因D的DNA片段長度（bp即堿基對）和部分堿基序列，圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構和部分堿基序列。現(xiàn)有Msp Ⅰ、BamH Ⅰ、Mbo Ⅰ、Sma Ⅰ4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。請回答下列問題：

（1）圖1的一條脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個堿基之間依次由         連接。

（2）若用限制酶Sma Ⅰ完全切割圖1中DNA片段，其產(chǎn)物長度為               。

（3）若圖1中虛線方框內(nèi)的堿基對被T－A堿基對替換，那么基因D就突變?yōu)榛�因d。從雜合子分離出圖1及其對應的DNA片段，用限制酶Sma Ⅰ完全切割，產(chǎn)物中共有      種不同DNA片段。

（4）若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進行，形成重組質(zhì)粒，那么應選用的限制酶是              。在導入重組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加             的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。經(jīng)檢測，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達，其最可能的原因是                                          。

 

Answer 1

【答案】

（每空1分，共6分）

（1）脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖　　（2）537bp、790bp、661bp（3）4　　

（4）BamH I  抗生素B　　同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D與質(zhì)粒反向連接

【解析】

試題分析：（1）一條鏈中的兩個堿基是依次由脫氧核糖、磷酸、脫氧核糖連接。

（2）由題意可知在DNA片段中有2個該酶酶切位點，切割后會產(chǎn)生537bp、790bp、661bp三個片段。

（3）雜合子是Dd,D被酶切為3段，d中只有一個酶切位點，切成2個片段，有一個是與D相同的661片段，故共4種。

（4）酶切時應將目的基因片段完全切下來，而在質(zhì)粒上只能切開一個缺口，根據(jù)題干中信息用BamH I最好，由圖2可知該質(zhì)粒含抗生素B抗性基因故培養(yǎng)基中需添加抗生素B。目的基因不能正確表達的原因可能是同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D與質(zhì)粒反向連接。

考點：本題考查基因工程相關知識，意在考察考生對知識點的理解和信息提取分析能力。