Question

研究發(fā)現(xiàn)：端粒在不同物種細胞中對于保持染色體穩(wěn)定性和細胞活性有重要作用，端粒酶是一種逆轉錄酶，能延長縮短的端粒（縮短的端粒其細胞復制能力受限），從而增強體外細胞的增殖能力。端粒酶在正常人體組織中的活性被抑制，在腫瘤中被重新激活，端粒酶可能參與惡性轉化�？茖W家通過探究DNA載體途徑的RNA干擾技術抑制端粒酶的活性，從而抑制腫瘤細胞生長增殖以尋找一種抑制腫瘤細胞的新途徑。

　 方法思路：

　 ①構建干擾質粒　　　　　　　　　 （插入針對人體端粒酶逆轉錄酶亞基（hTERT）的mRNA的干擾序列）和對照質粒PSG—CTR（插入不針對人體任何mRNA序列的對照組序列）。

　 ②將空質粒PSG（不含目的基因）、干擾質粒和對照質粒分別感染肝癌細胞。

　












③一段時間后觀察檢測細胞的　　　　　　 　　　　　　　　。計算細胞凋亡率，繪制肝癌細胞生長曲線。結果如下圖：

　

請回答：

　 （1）完成實驗步驟中的空格：

　　　 ①　　　　　　　　　　　 ；②　　　　　　　　　　　 。

　 （2）在構建質粒時，要將質粒導入大腸桿菌細胞并用　　　　　　　 培養(yǎng)基進行篩選鑒定，然后再提取。因此，在構建的表達載體質粒上必須含有　　　　　　　 。

　 （3）端粒酶可以通過以自身的　　　　　 為模板，　　　　　　　　　 為原料來合成端粒DNA。

（4）根據(jù)題意請分析實驗結果并得出結論。

　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

　　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。

Answer 1

 答案:（1）①PSG－AS  ③端粒酶活性、細胞凋亡情況、細胞生長情況

（2）選擇  標記基因

（3）RNA   4種脫氧核苷酸

（4）從結果可知PSG-AS導入肝癌細胞發(fā)揮作用后，端粒酶活性降低，細胞凋亡率升高，細胞生長受抑制，說明通過DNA載體途徑的RNA干擾技術抑制端粒酶活性的方法，能較好抑制腫瘤細胞。

解析: （1）由曲線圖或柱形圖可知，①為PSG－AS，③為端粒酶活性、細胞凋亡情況、細胞生長情況。（2）基因工程用選擇培養(yǎng)基進行篩選鑒定。（3）端粒酶是一種逆轉錄酶，進行逆轉錄。（4）從柱形圖可知PSG-AS導入肝癌細胞發(fā)揮作用后，端粒酶活性降低，細胞凋亡率升高；從曲線圖可知PSG-AS導入肝癌細胞發(fā)揮作用后，細胞生長受抑制。說明通過DNA載體途徑的RNA干擾技術抑制端粒酶活性的方法，能較好抑制腫瘤細胞。