Question

(14分) 2009年10月，我國(guó)自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)水稻“華恢1號(hào)”獲得農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的安全證書。右圖表示該抗蟲(chóng)水稻主要培育流程，據(jù)圖回答：

(1)                     ④過(guò)程應(yīng)用的主要生物技術(shù)是              。
(2)                     殺蟲(chóng)基因（crylA）是人們根據(jù)幾種Bt毒蛋白的分子結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)并人工合成的，這屬于          工程技術(shù)范疇。
(3)                     組建理想的載體需要對(duì)天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造。下圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制性內(nèi)切酶作用位點(diǎn)），據(jù)圖分析：

①人工改造時(shí)，要使抗蟲(chóng)基因表達(dá)，還應(yīng)插入____________。
②人工改造時(shí)用限制酶Ⅱ處理，其目的是：第一，去除質(zhì)粒上的           基因（填符號(hào)），保證T-DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會(huì)引起細(xì)胞的無(wú)限分裂和生長(zhǎng)；第二，使質(zhì)粒帶有單一限制酶作用位點(diǎn)，有利于___________的準(zhǔn)確插入。第三，使質(zhì)粒大小合適，可以提高轉(zhuǎn)化效率等。
③若用限制酶Ⅰ分別切割改造過(guò)的理想質(zhì)粒和帶有抗蟲(chóng)基因的DNA分子，并構(gòu)成重組Ti質(zhì)粒。分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導(dǎo)入抗蟲(chóng)基因的水稻胚細(xì)胞，觀察到的細(xì)胞生長(zhǎng)的現(xiàn)象是             。
(4)                     若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端為，則該酶識(shí)別的核苷酸序列是                。

Answer 1

(1) 植物組織培養(yǎng)
(2) 蛋白質(zhì)
(3) ①啟動(dòng)子
②tms和tmr 目的基因（或外源DNA）準(zhǔn)確插入
③在含卡那霉素的培養(yǎng)基能夠生長(zhǎng)，而在含四環(huán)素的培養(yǎng)基中不能生長(zhǎng)
(4) GACGTC

解析