Question

【題目】某學校打算開辟一塊食用菌栽培基地，以豐富學生的勞動技術(shù)課內(nèi)容。首先對食用菌實驗室進行清掃和消毒處理，準備食用菌栽培所需的各種原料和用具，然后從菌種站購來各種食用菌菌種。請回答下列問題：

(1)牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基配方如下：

牛肉膏	蛋白胨	NaCl	瓊脂	蒸餾水
5.0 g	10.0 g	5.0 g	20.0 g	定容至1 000 mL

其中提供氮源的是_________________。微生物在生長過程中對各種成分所需量不同，配制培養(yǎng)基時，溶化后滅菌前還應注意____________。

(2)將配制好的培養(yǎng)基分裝到試管中，加棉塞后若干個試管一捆，包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入___________中滅菌，先把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將其中原有____________徹底排出后將鍋密閉。滅菌壓力100kPa，溫度__________，時間15～30min。滅菌完畢后如果棉塞上沾有培養(yǎng)基，此試管應________。

(3)如圖為倒平板操作過程，操作時要待培養(yǎng)基______________________________時，在酒精燈火焰附近進行。制備固體培養(yǎng)基時，要待平板冷凝后，將平板倒置，其主要目的是__________________________________________________。

Answer 1

【答案】牛肉膏、蛋白胨 調(diào)節(jié)pH 高壓蒸汽滅菌鍋 冷空氣 121℃ 廢棄 冷卻至50℃左右 防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠滴入培養(yǎng)基造成污染

【解析】

制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的一般步驟是：計算、稱量、溶化、滅菌、倒平板。培養(yǎng)基的滅菌一般采用高壓蒸汽滅菌。微生物的實驗室培養(yǎng)的關(guān)鍵在于防止雜菌污染，平板冷凝后要將平板倒置，其原因是防止皿蓋冷卻水倒流入培養(yǎng)基而造成污染。

（1）制備固體牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基所需的原料主要有牛肉膏、蛋白胨、水、無機鹽和瓊脂等。配方中能夠提供氮源的是蛋白胨和牛肉膏，其中牛肉膏還可以提供能源。微生物在生長過程中對各種成分所需量不同，配制培養(yǎng)基時，溶化后滅菌前還應注意調(diào)節(jié)pH，以滿足不同微生物生長對pH的需求。
（2）培養(yǎng)基滅菌應用高壓蒸汽滅菌法，故配制好的培養(yǎng)基分裝到試管中，加棉塞后若干個試管一捆，包上牛皮紙并用皮筋勒緊放入高壓蒸汽鍋中滅菌。使用高壓蒸汽滅菌鍋時應注意，先向鍋內(nèi)倒入適量的水，把鍋內(nèi)水加熱煮沸并將其中原有的冷空氣徹底排出后再將鍋密閉。進行高壓蒸汽滅菌的條件是壓力100kPa，溫度121℃，時間15～30min。滅菌完畢后如果棉塞上沾有培養(yǎng)基，為防止培養(yǎng)基污染，此試管應廢棄掉。
（3）倒平板時要待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時，在酒精燈火焰附近進行。制備固體培養(yǎng)基時，要待平板冷凝后，將平板倒置，其主要目的是防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠滴入培養(yǎng)基造成污染。