我國(guó)首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場(chǎng)自然分娩產(chǎn)出，這標(biāo)志著我國(guó)在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答：
(1)過(guò)程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多也最有效的方法是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。重組質(zhì)粒除了帶有綠色熒光蛋白基因以外，還必須含有＿＿＿＿、＿＿＿＿、＿＿＿＿等才能構(gòu)成一個(gè)完整的基因表達(dá)載體。
(2)將所采集到的卵母細(xì)胞在體外培養(yǎng)到＿＿＿＿＿＿＿＿期即可通過(guò)顯微操作將其細(xì)胞核去除并形成重組細(xì)胞，然后再通過(guò)＿＿＿＿＿＿＿＿技術(shù)培養(yǎng)成早期胚胎。
(3)早期胚胎的培養(yǎng)液成分較復(fù)雜，人們對(duì)細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)還沒(méi)有完全搞清楚，通常加入＿＿＿＿等一些天然成分。
口算題天天練系列答案
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科目：高中生物 來(lái)源：2014屆甘肅秦安一中高三第一次檢測(cè)生物卷（解析版） 題型：綜合題
（共12分）下圖表示我國(guó)首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的具體培育過(guò)程。
請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：
(1)上述過(guò)程涉及的現(xiàn)代生物工程技術(shù)，屬于分子水平的是___________，其核心步驟是______________________ 。
（2）構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的 處，DNA連接酶作用于 處。（填“a”或“b”）,b箭頭指的的是 ，PCR過(guò)程斷裂此鍵用 。
(3)若要獲得單個(gè)的成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，需用___________處理豬胚胎的部分組織。
(4)E過(guò)程中若要獲得大量的卵母細(xì)胞需用___________激素處理成年母豬。
(5)H過(guò)程的名稱是______ ___，所選擇的胚胎一般處于_______ 期較合適。
(6)經(jīng)過(guò)培養(yǎng)得到早期胚胎后可以用胚胎分割技術(shù)以獲得更多基因型______ (相同/不相同)的轉(zhuǎn)基因克隆豬胚胎，且在進(jìn)行H過(guò)程之前，需要對(duì)代孕母豬進(jìn)行___________處理，以給早期胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境。
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科目：高中生物 來(lái)源：2014屆浙江省東陽(yáng)市高三八月月考生物試卷 題型：綜合題
下圖表示我國(guó)首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的具體培育過(guò)程。
請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題：
(1)上述過(guò)程涉及的現(xiàn)代生物工程技術(shù)，屬于分子水平的是___________，其核心步驟是_______________。
(2)若要獲得單個(gè)的成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，需用___________處理豬胚胎的部分組織。
(3)E過(guò)程中若要獲得大量的卵母細(xì)胞需用___________激素處理成年母豬。
(4)H過(guò)程的名稱是______ ___，所選擇的胚胎一般處于_______ 期較合適。
(5)經(jīng)過(guò)培養(yǎng)得到早期胚胎后可以用胚胎分割技術(shù)以獲得更多基因型______ (相同/不相同)的轉(zhuǎn)基因克隆豬胚胎，且在進(jìn)行H過(guò)程之前，需要對(duì)代孕母豬進(jìn)行___________處理，以給早期胚胎移入受體提供相同的生理環(huán)境。
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科目：高中生物 來(lái)源：2013屆海南省高二下學(xué)期期中考試生物試卷（解析版） 題型：綜合題
2008年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。綠色熒光蛋白能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動(dòng)情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖，據(jù)圖回答：
注：圖中通過(guò)過(guò)程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個(gè)切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個(gè)酶Ⅱ的切點(diǎn)。
（1）在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來(lái) ，理由是： 。
（2）過(guò)程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多的方法是 。
（3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是 。獲得的轉(zhuǎn)基因克隆豬，可以解決的醫(yī)學(xué)難題是，可以避免 。
（4）目前科學(xué)家們通過(guò)蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過(guò)程的正確順序是： （用數(shù)字表示）。
①推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)序列
③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）
④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白。
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科目：高中生物 來(lái)源：2013屆廣東省連州市高二下學(xué)期期中考試生物試卷（解析版） 題型：綜合題
日本下村修、美國(guó)沙爾菲和美籍華人錢(qián)永健因在研究綠色熒光蛋白(GFP)等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白(GFP)轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖。據(jù)圖回答：
(1)圖中通過(guò)過(guò)程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性核酸內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性核酸內(nèi)切酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，請(qǐng)畫(huà)出質(zhì)粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端：__________________________________________________。
(2)過(guò)程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多也最有效的方法是________________________________。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是______________________________。
(4)目前科學(xué)家們通過(guò)蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過(guò)程的正確順序是(用數(shù)字表示)________________________。
①推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸
②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)序列
③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾(合成)
④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白
（5）若要在體外擴(kuò)增綠色熒光蛋白基因可采用PCR技術(shù)。標(biāo)準(zhǔn)的PCR過(guò)程分為三個(gè)步驟，第一步是“變性”,這一步驟如果發(fā)生在細(xì)胞內(nèi)，是在 的作用下完成的；第二步是退火；第三步是“延伸”，需要用到 酶。
(6)以上培育過(guò)程中應(yīng)用到的生物技術(shù)有_________________________________________等。(至少答出三項(xiàng))
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科目：高中生物 來(lái)源：2010-2011學(xué)年上海市嘉定區(qū)高三上學(xué)期第一次質(zhì)量調(diào)研生物試卷 題型：綜合題
分析回答有關(guān)生物工程中的問(wèn)題：（8分）
日本下村修、美國(guó)沙爾菲和美籍華人錢(qián)永健因在研究綠色熒光蛋白（GFP）等方面的突出貢獻(xiàn)，獲得2008年度諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。下圖為我國(guó)首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過(guò)程示意圖．據(jù)圖回答：
（1）綠色熒光蛋白基因在該實(shí)驗(yàn)中是做為________基因。圖中通過(guò)過(guò)程①、②形成重組質(zhì)粒，需要限制性內(nèi)切酶切取目的基因、切割質(zhì)粒。限制性內(nèi)切酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是—G’GATCC—，請(qǐng)畫(huà)出質(zhì)粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的過(guò)程：________________________
_________。
（2）過(guò)程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時(shí)，采用最多也最有效的方法是_______________ ___。
(3)如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因，其作用是_______________________。
(4)目前科學(xué)家們通過(guò)蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白，黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過(guò)程的正確順序是（用數(shù)字表示）：_______ ___ 。
①推測(cè)藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白。
(5)在培養(yǎng)重組細(xì)胞時(shí)，培養(yǎng)液中通常含有_____________、氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素和動(dòng)物血清等。
(6)以上培育過(guò)程中應(yīng)用到的生物技術(shù)有_________________________________等（至少答出三項(xiàng)）。
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