Question

47．(7分)番茄果實(shí)成熟過(guò)程中，某種酶(PG)開始合成并顯著增加，促使果實(shí)變紅變軟。但不利于長(zhǎng)途運(yùn)輸和長(zhǎng)期保鮮。科學(xué)家利用反義RNA技術(shù)(見(jiàn)圖解)，可有效解決此問(wèn)題。該技術(shù)的核心是，從番茄體細(xì)胞中獲得指導(dǎo)PG合成的信使RNA，繼而以該信使RNA為模板人工合成反義基因并將之導(dǎo)入離體番茄體細(xì)胞，經(jīng)組織培養(yǎng)獲得完整植株。新植株在果實(shí)發(fā)育過(guò)程中，反義基因經(jīng)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的反義RNA與細(xì)胞原有mRNA(靶mRNA)互補(bǔ)形或雙鏈RNA，阻止靶mRNA進(jìn)一步翻譯形成PG，從而達(dá)到抑制果實(shí)成熟的目的。請(qǐng)結(jié)合圖解回答：

(1)若要將人工合成的完整反義基因克隆出成百上千的反義基因，可用        (寫出中文名稱)技術(shù)實(shí)現(xiàn)體外快速擴(kuò)增。

(2)假設(shè)PCR反應(yīng)中的初始只有一個(gè)DNA作為模板， n輪循環(huán)的產(chǎn)物中含有模板DNA鏈的DNA分子有     個(gè)、含有人工合成的DNA引物的DNA分子有    個(gè)。若DNA分子中共含900個(gè)堿基對(duì)，堿基數(shù)量滿足：(A+T)／(G+C)=1／2，經(jīng)5次循環(huán)，至少需要向試管中加入     個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸(不考慮引物所對(duì)應(yīng)的片段)。

(3)PCR反應(yīng)中所用到的酶是      ，其具有       的特性。

(4)普通番茄細(xì)胞導(dǎo)入目的基因后，先要接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，脫分化后得到           ，再轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)出試管苗，然后進(jìn)一步培養(yǎng)成正常植株。

Answer 1

【答案】

47.（7分）

（1）多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)

（2）2      2ⁿ    9300

（3）Taq酶     耐高溫

（4）愈傷組織

【解析】考查PCR技術(shù)、基因工程的原理、過(guò)程及應(yīng)用。得到重組質(zhì)粒要用到同一種的限制性內(nèi)切酶處理目的基因和運(yùn)載體，得到相同的粘性末端再用DNA連接酶將之連接起來(lái)構(gòu)成基因表達(dá)載體 ，PCR反應(yīng)中所用到的酶是Taq酶 該酶具有耐高溫的特性