Question

（05天津卷）（18分）

（1）限制性內(nèi)切酶Ⅰ的識別序列和切點(diǎn)是―G^↓GATCC―，限制性內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列和切點(diǎn)是―^↓GATC―。在質(zhì)粒上有酶Ⅰ的一個切點(diǎn)，在目的基因的兩側(cè)各有1個酶Ⅱ的切點(diǎn)。

①請畫出質(zhì)粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

 

②請畫出目的基因兩側(cè)被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。

 

③在DNA連接酶的作用下，上述兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端能否連接起來？為什么？

Answer 1

答案：

①

②

③可以連接。因為由兩種不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的（或是可以互補(bǔ)的）

解析：限制性內(nèi)切酶能識別DNA分子上特定的序列和切點(diǎn)并進(jìn)行切割，限制性內(nèi)切酶具有專一性，即一種限制性內(nèi)切酶只能識別一種特定的核苷酸序列。被限制內(nèi)切酶切開的DNA兩條單鏈切口，各含有幾個伸出的、可互補(bǔ)配對的核苷酸，這種切口就是黏性末端。黏性末端之間，只要切口處伸出的核苷酸間存在互補(bǔ)，就能在DNA連接酶的作用下連接起來。雖然限制性內(nèi)切酶I和限制性內(nèi)切酶II識別的序列和切點(diǎn)是不同的，但是形成的黏性末端是相同的，存在著互補(bǔ)關(guān)系，因此在DNA連接酶的作用下是可以連接起來的。